Isolierung von schädelförmigen Nervenfalten aus einem Kükenembryo für eine Zellkultur der Neuralleiste

Nehmen Sie einen Hühnerembryo, der in einem Filterpapierrahmen gelagert ist, und positionieren Sie ihn unter einem Präpariermikroskop.

Entfernen Sie die Vitellinmembran, eine Schutzschicht, die den Embryo umgibt.

Identifizieren Sie die Neuralfalten des Mittelhirns, die sich hinter den Sehlappen und vor der Herzsichel, dem embryonalen Vorläufer des reifen Herzens, befinden.

Die Neuralfalten enthalten prämigratorische Neuralleistenzellen, bei denen es sich um multipotente Stammzellen handelt, die sich während der Entwicklung in wandernde Zellen verwandeln.

Diese wandernden Zellen differenzieren sich in neuronale und nicht-neuronale Zellen.

Schneiden Sie den dorsalsten Aspekt der Neuralfalten heraus und geben Sie das Gewebe in eine Kulturschale mit Puffer.

Legen Sie anschließend Deckgläser, die mit einem Adhäsionsprotein beschichtet sind, in Kulturplattenvertiefungen, die Medien enthalten.

Übertragen Sie die Neuralfalten auf die beschichteten Deckgläser. Inkubieren, um die Gewebebefestigung zu erleichtern.

Während der Kultivierung treten wandernde Neuralleistenzellen aus den Neuralfalten auf die beschichtete Oberfläche auf, wodurch sich eine Neuralleisten-Zellkultur bildet.

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