Isolierung von Neuronen vestibulärer Ganglien aus dem Innenohr einer Maus

Nehmen Sie die Hälfte des Kopfes eines Mäusewelpen und entfernen Sie das Gehirn.

Schneiden Sie die Oberseite des Schädels ab und schneiden Sie das umgebende Gewebe heraus, um die otische Kapsel sichtbar zu machen, eine knöcherne äußere Schicht, die die Innenohrstrukturen schützt.

Übertragen Sie das Gewebe auf eine Kulturplatte, die ein gepuffertes Medium enthält.

Trennen Sie die oberen und unteren Vestibularganglien, die die vestibulären Nervenzellkörper enthalten.

Rasieren Sie den knöchernen Kamm ab und entnehmen Sie das darunter liegende Ganglion superior.

Das Ganglion superior wird auf eine frische Platte mit dem gepufferten Medium übertragen.

Entfernen Sie anhaftendes Gewebe von der Oberfläche, um das isolierte Ganglion zu reinigen.

Lege das Ganglion in eine Lösung, die proteolytische Enzyme enthält.

Die Enzyme bauen die extrazelluläre Matrix des Gewebes ab und lockern die Zellen auf.

Übertragen Sie das Ganglion in eine polymerbeschichtete Glasbodenschale, die Kulturmedium enthält, und dissoziieren Sie das Gewebe mechanisch, um die Zellen freizusetzen.

Inkubieren, damit die Zellen adhäsieren und eine vestibuläre Ganglien-Neuronenkultur etablieren können.

Schöpfen Sie das Gehirn