Co-Kultur von Schwann-Zellen mit DRG-Neuronen auf einer vorgedehnten Membran

Nehmen wir eine Silikonkammer, die an einer matrixbeschichteten, gedehnten Siliziummembran befestigt ist.

Spinalganglien oder DRG-Zellsuspension zugeben und inkubieren.

Die Matrix fördert die Zelladhäsion und -vermehrung, während die gedehnte Oberfläche die Axonausrichtung steuert.

Fügen Sie Wachstumsinhibitoren hinzu, die sich aktiv teilende Gliazellen eliminieren, sodass nicht teilende Neuronen überleben können.

Entfernen Sie das Medium. Fügen Sie ein Wachstumsmedium hinzu und inkubieren Sie.

Das Neuron spürt eine erhöhte Membransteifigkeit in gedehnter Richtung und richtet das Axonwachstum entsprechend aus.

Kultivierte und geerntete Schwann-Zellen in die DRG-Kultur geben und inkubieren.

Die Schwann-Zellen heften sich an das regenerierte Axon und isolieren das Neuron.

Dies verbessert das Überleben und die Funktionalität von Neuronen und etabliert eine Co-Kultur.

Entfernen Sie vor dem Aussäen der DRG-Neuronen die PLL-Lösung aus der Kammer. Spülen Sie die PDMS-Oberfläche mit sterilem Wasser ab und trocknen Sie sie an der Luft. Lassen Sie die Suspension nach dem Resuspendieren der Zellen 1 bis 2 Minuten einwirken, damit sich die Ablagerungen am Boden des Röhrchens absetzen können. G