Isolierung von aus Fettgewebe gewonnenen Stammzellen aus periaortalem Fettgewebe der Maus
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:52 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir geerntetes transgenes periaortales Fettgewebe der Maus, das fluoreszierende Protein-exprimierende Fettstammzellen enthält, die von Neuralleistenzellen (NCCs) abstammen.
Fügen Sie Verdauungsmedien hinzu und hacken Sie das Gewebe.
Übertragen Sie das zerkleinerte Gewebe mit dem Verdauungsmedium in ein Röhrchen. Dissoziieren Sie die Fragmente mechanisch.
ausbrüten. Die Kollagenase in den Medien verdaut die extrazelluläre Matrix des Gewebes und setzt Stammzellen, Adipozyten und Fibroblasten frei.
Fügen Sie serumhaltige Medien hinzu, um die Kollagenase-Aktivität zu stoppen. Zentrifugieren Sie den Überstand mit Adipozyten und verwerfen Sie ihn.
Suspendieren Sie die Zellen erneut in Medien, und filtern Sie, um Aggregate zu entfernen.
Das Filtrat zentrifugieren und den Überstand entfernen. Resuspendieren Sie die Zellen im Erythrozytenlysepuffer, um Erythrozyten zu lysieren.
Fügen Sie serumhaltigen Puffer hinzu, um die Lyse zu stoppen. Zentrifugieren und den Überstand verwerfen.
Resuspendieren Sie die Zellen im Puffer.
Führen Sie eine fluoreszenzaktivierte Zellsortierung durch, um fluoreszierende Stammzellen zu isolieren.
Die isolierten Stammzellen können für weitere Experimente v
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