JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:52 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie ein Dünndarmsegment der Maus, das zuvor von den Längsmuskeln und dem Plexus myentericus, von Schichten, die enterische Neuronen enthalten, und von Gliazellen befreit wurde.
Schneiden Sie das Gewebe auf und legen Sie es in einen EDTA-haltigen Puffer. Inkubieren Sie mit Schaukeln.
EDTA stört Zell-Zell-Verbindungen und löst die Epithelschleimhaut von den darunter liegenden Lamina propria und Submukosa, Bindegewebsschichten, die enterische Gliazellen enthalten.
Pipettieren Sie wiederholt, um die Epithelzellen zu entfernen.
Filtrieren Sie durch ein Zellsieb und entsorgen Sie den Durchfluss.
Übertragen Sie das Gewebe in einen nicht-enzymatischen Dissoziationspuffer und inkubieren Sie es unter Schaukeln. Der Dissoziationspuffer lockert die Lamina propria und die submuköse extrazelluläre Matrix und löst die Zellen ab.
Pipettieren Sie wiederholt, um die Zellen weiter zu dissoziieren.
Filtrieren Sie durch ein Zellsieb, um die Zellen zu sammeln.
Zentrifugieren Sie die Zellen und resuspendieren Sie sie in einem Puffer.
Nehmen Sie mit Adhäsionsproteinen beschichtete Vertiefungen, die ein gliales Wachstumsmedium enthalten, und plattieren Sie die Zellen.
Die Beschichtung erleichtert di
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos