Reinigung der Kapillaren aus dem Schweinegehirn

Nehmen Sie ein Schweinehirn.

Entfernen Sie die Hirnhäute, die Schutzmembran, die das Gehirn bedeckt, um eine Kontamination der Hirnhautzellen zu verhindern.

Kratzen Sie die graue Substanz ab, eine Region, die reich an Kapillaren ist, und sammeln Sie das Gewebe in einer Kulturschale mit Medien.

Führen Sie die graue Substanz ohne Nadel durch eine Spritze, um das Gewebe zu fragmentieren.

Übertragen Sie die Fragmente in einen Homogenisator und homogenisieren Sie, um das Gewebe weiter aufzulösen und die Gehirnkapillaren freizugeben.

Lassen Sie das Homogenat durch einen Filter mit einer bestimmten Porengröße, um die Kapillaren zurückzuhalten, damit andere Gehirnzellen durchströmen können.

Stellen Sie den Filter in eine Lösung, die Enzyme und DNase enthält.

Die Enzyme lösen die adhärenten Zellen ab, während DNase kontaminierende DNA abbaut und so die Isolierung reiner Kapillaren erleichtert.

Waschen Sie die Kapillaren aus dem Filter.

Fügen Sie Medien hinzu, die Serumproteine enthalten, um die Enzyme zu inaktivieren.

Übertragen Sie die Kapillaren in ein Röhrchen, zentrifugieren Sie und entfernen Sie den Überstand. Suspendieren Sie die reinen Kapillaren für die weitere Analyse in frischen M