JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:06 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Nervenzellsuspension, einschließlich unreifer Oligodendrozyten und primärer neuronaler Zellen, von einem Mausjungen.
Suspendieren Sie die Zellen in einem magnetischen Zellsortierpuffer, um ein Verklumpen der Zellen zu vermeiden.
Fügen Sie technisch hergestellte magnetische Mikrokügelchen hinzu, die Anti-O4-Antikörper auf ihrer Oberfläche tragen. Rühren Sie die Lösung um, um eine gleichmäßige Durchmischung zu gewährleisten.
Inkubieren, damit Mikrokügelchen an sulfatiertes Galaktolipid, ein O4-Antigen auf Oligodendrozyten, binden können, während andere Zellen ungebunden oder lose gebunden bleiben.
Waschen Sie die Mischung mit zusätzlichem Zellsortierpuffer.
Zentrifugieren und verwerfen Sie den Überstand, dann resuspendieren Sie die Zellen.
Geben Sie dann die an Kügelchen gebundenen Zellen in eine magnetische Trennsäule, die mit einem Filter ausgestattet ist, der die größeren Zellklumpen entfernt.
Während des Laufs bewegen sich die perlengebundenen Komplexe unter einem Magnetfeld auf den Magneten zu und heften sich an den Seiten.
Waschen, um ungebundene und lose gebundene Zellen zu entfernen.
Nehmen Sie die Säule aus dem Separator und waschen Sie sie mit einem Prolifer
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