Vorbereitung eines mikrostrukturierten Substrats zur Untersuchung von Schwann-Zell-Phänotypen

Nehmen Sie einen Siliziumwafer mit Mikromustern der gewünschten Geometrie, um Zellen in einer definierten Form zu züchten.

Gießen Sie eine Polymermischung darauf und lassen Sie es sich verfestigen.

Schneide einen quadratischen Stempel aus dem Polymer aus.

Beschichten Sie die gemusterte Oberfläche des Stempels mit einer Proteinschicht, die die Zellanhaftung erleichtert.

Entfernen Sie mit einem Luftstrom ungebundene Proteine.

Nehmen Sie ein polymerbeschichtetes Deckglas.

Lege die gemusterte Seite des Stempels darauf.

Drücken Sie auf den Stempel, um das Muster zu übertragen. Entfernen Sie den Stempel.

Übertragen Sie das Deckglas in eine Vertiefung, die ein Tensid enthält, um die blanken Oberflächen zu beschichten. Dies erhöht die Hydrophobie der Oberfläche und verhindert unerwünschte Zelladhäsionen.

Entfernen Sie das Tensid und waschen Sie es mit einem Phosphatpuffer.

Fügen Sie die Schwann-Zellen hinzu und lassen Sie sie sich an das Mikromuster anheften.

Mit einem Puffer waschen, um nicht anhaftende Zellen zu entfernen.

Kulturmedium hinzufügen und inkubieren.

Während die Zellen entlang der Oberfläche wachsen, nehmen sie die Form des Mikromusters an, was eine Untersuchung des Phänotyps