JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:32 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie ein Mäusegehirn, das in einen eiskalten Puffer getaucht ist.
Entfernen Sie das Kleinhirn und trimmen Sie den vorderen Abschnitt, der den medialen präfrontalen Kortex oder mPFC enthält.
Befestigen Sie das Gewebe an einem abgewinkelten Agarblock, der auf einen Vibratomen-Probentisch geklebt wird.
Bringen Sie zusätzliche Agarblöcke an, um die Stabilität beim Schneiden zu gewährleisten. Platzieren Sie den Tisch in der mit sauerstoffhaltigem Eiskaltpuffer gefüllten Vibratom-Schneidkammer.
Erzeugen Sie gekippte Schnitte, die die Amygdala enthalten, die auf Angstreize und neuronale Projektionen des mPFC reagieren, die synaptische Verbindungen in der Amygdala bilden und ihre Aktivität regulieren.
Die gekippten Schichten legen die Projektionen frei und ermöglichen so die Untersuchung der funktionellen Konnektivität zwischen dem mPFC und der Amygdala.
Schneiden Sie die Scheiben in zwei Hälften und legen Sie sie in eine Kammer mit sauerstoffhaltiger künstlicher Zerebrospinalflüssigkeit bei Raumtemperatur, um das Gewebe zu stabilisieren.
Inkubieren Sie die Scheiben bei physiologischer Temperatur, um das Gewebe für nachgelagerte Assays zurückzugewinnen.
Schneide mit einem Skalpell da
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