Gewinnung einer gemischten Gliazellkultur aus einem neonatalen Mausgehirn
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:26 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem neugeborenen Mausgehirn und übertragen Sie es in ein Röhrchen, das eine proteolytische Enzymlösung enthält.
Die Enzyme bauen die extrazelluläre Matrix des Gewebes ab und initiieren die Zelldissoziation.
Waschen Sie das verdaute Gewebe wiederholt mit einem Wachstumsmedium, um die Enzyme zu entfernen.
Bewege das Gewebe mit einer Pipette mit größerem Durchmesser wiederholt durch die Pipette, um es in kleinere Fragmente zu zerlegen.
Fahren Sie dann mit einer Pipette mit kleinerem Durchmesser fort, die Fragmente zu dissoziieren, wodurch eine Zellsuspension entsteht.
Filtrieren Sie diese Suspension, um Zellklumpen zu entfernen, und erhalten Sie eine Einzelzellsuspension, die primäre Neuronen und eine gemischte Population von Gliazellen, einschließlich Mikroglia und Astrozyten, enthält.
Die Zellen werden in einen Kulturkolben mit einem Wachstumsmedium gesät und inkubiert, um ihre Adhärenz zu fördern.
Im Laufe der Zeit führt das Fehlen von Neuronenwachstumsfaktoren in den Medien zum Absterben von Neuronen.
Ersetzen Sie die verbrauchten Medien durch neue Medien. Gliazellen nutzen die Nährstoffe und vermehren sich, wodurch eine gemischte Gliakultur aus Astrozyten und M
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