JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:03 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte mit geringer Adhärenz, die humaninduzierte pluripotente Stammzellen in einem Embryoidkörper oder EB-Medium enthält.
Zentrifuge, um die Zellen abzusetzen. Inkubieren, um die Zellproliferation und -aggregation zu fördern und Embryoidkörper zu bilden.
Die Regulatoren der Zelllinie fördern die Zelldifferenzierung in myeloische Vorläuferzellen.
Sammeln Sie diese EBs und übertragen Sie sie an den Rand einer extrazellulären Matrix oder einer EZM-beschichteten Platte.
Ersetzen Sie das Medium durch einen primitiven Makrophagen-Vorläufer oder ein PMP-Differenzierungsmedium und rühren Sie es vorsichtig auf. Inkubieren, um die Bindung der EBs an das ECM zu erleichtern.
Ersetzen Sie die Hälfte des Mediums und inkubieren Sie.
Die hämatopoetischen Wachstumsfaktoren treiben myeloische Vorläuferzellen an, sich zu primitiven Makrophagen-Vorläufern zu differenzieren, die sich von den EBs trennen und im Medium erscheinen.
Sammeln Sie diese PMPs und schleudern Sie die Zellen herunter. Resuspendieren Sie sie in einem Mikroglia-Differenzierungsmedium.
Aussäen Sie diese Zellen in einer lamininbeschichteten Multi-Well-Platte und inkubieren Sie.
PMPs nutzen die Diffe
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