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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:10 Min. • July 8th, 2025
Eine Suspension von Zellen, die aus transgenen Caenorhabditis elegans-Würmern gewonnen wurden, in einem Nährmedium entnehmen.
Die Suspension enthält Zellen aus verschiedenen Geweben, darunter auch Neuronen aus dem Nervensystem.
Die transgenen Würmer wurden so verändert, dass sie ein fluoreszierendes Protein exprimieren, das an einen vesikulären Transmembrantransporter konjugiert ist. Dieser Transporter, der auf synaptischen Vesikeln vorhanden ist, die den Neurotransmitter Acetylcholin transportieren, kommt in cholinergen Neuronen im ganzen Körper vor.
Die Zellsuspension zentrifugieren und den Überstand verwerfen. Resuspendieren Sie die Zellen in einem frischen Kulturmedium für die fluoreszenzaktivierte Zellsortierung (FACS).
Analysieren Sie die Zellsuspension mit FACS. Die fluoreszenzmarkierten cholinergen Neuronen emittieren Fluoreszenz, wenn sie Licht einer geeigneten Wellenlänge ausgesetzt werden, wodurch sie von anderen unmarkierten Zellen getrennt werden.
Übertragen Sie die isolierten Neuronen in eine Multiwell-Platte. Inkubieren Sie die Zellen in einer befeuchteten Kammer, um den Feuchtigkeitsgehalt aufrechtzuerhalten.
Zellen aus der isolierten Zellsuspension bei 10.000 mal g
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