Vorbereitung des Vomeronasalorgans der Maus für die Vibratom-Schnittung

Beginnen Sie mit einem vomeronasalen Organ der Maus (VNO), das sich an der Basis der Nasenscheidewand befindet.

Diese enthält eine dünne Gewebeschicht, in der sich spezielle geruchsempfindliche Neuronen befinden, die Pheromone erkennen.

Geben Sie einen Tropfen kalte Lösung in den VNO, um ein Austrocknen zu verhindern.

Trennen Sie jede VNO-Kapsel vom Knochengewebe und dem zentralen Knochen.

Entfernen Sie die umgebende Knorpelkapsel.

Übertragen Sie das VNO auf eine kalte Oberfläche und fügen Sie einen Tropfen kalte Lösung hinzu, um Gewebeschäden zu minimieren.

Tauchen Sie das VNO in geschmolzene Agarose, bewegen Sie es, um überschüssige Lösung zu entfernen, und positionieren Sie das VNO dann senkrecht. Auf Eis legen, um die Agarose zu verfestigen und das VNO einzubetten.

Die erstarrte Agarose invertieren und in die gewünschte Form schneiden.

Befestigen Sie die Blöcke auf einer Probenplatte.

Schneiden Sie nun das Gewebe mit einem Vibratom durch.

Lagern Sie die Schnitte in einer sauerstoffhaltigen Kammer mit einer pH-angepassten Lösung, um die Zellaktivität für weitere Studien aufrechtzuerhalten.

Übertragen Sie das VNO in eine kleine Petrischale unter einem Stereomikroskop auf einem Ei