Vorbereitung von rhinalen Cortex-Hippocampus-Schnitten aus dem Gehirn eines Rattenwelpen

Nehmen Sie ein frisch geerntetes Gehirn eines Rattenwelpen mit der Rückenseite nach oben in eine Kulturplatte mit gekühltem Puffer.

Öffnen Sie die Gehirnhälften und entfernen Sie das Gewebe, das den Hippocampus bedeckt.

Schneiden Sie die Hemisphären so ein, dass sie die Hippocampi und die rheinische Rinde enthalten.

Legen Sie beide Hemisphären mit den Hippocampi nach oben und parallel auf ein Filterpapier.

Übertragen Sie diese Anordnung auf einen Gewebezerkleinerer, wobei die Klinge senkrecht zu den Halbkugeln steht.

Schneiden Sie die Halbkugeln auf die gewünschte Dicke, um Scheiben zu erhalten, und geben Sie sie auf eine Kulturplatte mit gekühltem Puffer.

Trennen Sie die Scheiben vorsichtig und zerlegen Sie sie, um strukturell intakte Regionen des Hippocampus und der rheinalen Rinde einzubeziehen.

Übertragen Sie die Scheiben auf membranöse Einsätze in einer Multiwell-Platte, die das Medium enthält.

Entfernen Sie den überschüssigen Puffer von den Scheiben und inkubieren Sie sie zur Gewebewiederherstellung.

Aktualisieren Sie die Medien. Die Scheiben können für die weitere Analyse verwendet werden.

Übertragen Sie das Gehirn mit der Rückenseite nach oben in eine 60-Millimeter-Platte,