Generierung eines 3D-Co-Kulturmodells von humanen Hornhautfibroblasten und Neuronen

Nehmen wir menschliche Hornhautfibroblasten.

Übertragen Sie sie auf einen Membraneinsatz in einer Multiwell-Platte, die das Medium enthält.

Fügen Sie dem Membraneinsatz Medien hinzu. Inkubieren für die Adhärenz der Fibroblasten an der Einlage.

Ersetzen Sie anschließend das Medium durch Medien, die Vitamin C im Membraneinsatz und im Reservoir enthalten.

ausbrüten. Vitamin C regt die Fibroblasten an, eine extrazelluläre 3D-Matrix zu sezernieren und zusammenzusetzen.

Geben Sie eine humane Neuroblastom-Zellsuspension über die Fibroblasten.

Inkubieren, um die Adhäsion von Neuroblastomzellen zu ermöglichen.

Geben Sie nun Medien mit Retinsäure über die Zellen und ergänzen Sie das Reservoir mit frischen Medien.

ausbrüten. Retinsäure löst die Differenzierung der Neuroblastomzellen in neurale Vorläuferzellen aus.

Entfernen Sie anschließend das Medium. Führen Sie frisches Medium in das Reservoir ein. Geben Sie Medien, die einen neurotrophen Faktor enthalten, in die Membraneinlage und inkubieren Sie.

Neurotrophe Faktoren lösen die Differenzierung von Vorläuferzellen in Neuronen aus und erzeugen ein 3D-Co-Kulturmodell von menschlichen Hornhautfibroblasten und Neuronen.

Um 3D-Konstrukte zusammen