JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:12 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem immobilisierten Maushirnschnitt, der in einer Aufnahmekammer des Elektrophysiologie-Setups platziert wird, die mit einer künstlichen Zerebrospinalflüssigkeit gefüllt ist, um die Lebensfähigkeit der Neuronen zu erhalten.
Der Aufbau besteht aus einer vormontierten, mit kationischer Lösung gefüllten Aufzeichnungsmikropipette, die mit einem Verstärker und einer Druckkontrolleinheit verbunden ist.
Lokalisieren Sie unter einem Mikroskop ein Neuron und positionieren Sie die Mikropipette in der Nähe.
Üben Sie positiven Luftdruck aus, um Schmutz zu entfernen.
Bewegen Sie die Mikropipette in Richtung des Neurons, bis sich ein Grübchen auf der Membran bildet, das auf eine neuronale Nähe hinweist.
Wenden Sie einen schwachen Sog an, um ein kleines Membranpflaster in die Mikropipette zu ziehen.
Dadurch entsteht eine dichte Abdichtung, die den Widerstand der Mikropipette erhöht und eine stabile Abdichtung bestätigt.
Halten Sie das Potenzial der Zelle auf einem physiologischen Ruhepotenzial für die Zellstabilität.
Üben Sie dann einen kurzen, starken Sog aus, um die Patch-Membran aufzubrechen und eine direkte Verbindung mit dem Inneren der Zelle herzustellen.
Diese Ganzzellko
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