JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:05 Min. • July 8th, 2025
Platzieren Sie eine flach montierte Mausnetzhaut in einer physiologischen Lösung in einer Aufnahmekammer.
Positionieren Sie mit einem Mikroskop eine Aufzeichnungspipette über der Netzhaut. Die Pipette enthält eine Elektrode und ist mit einer internen Lösung gefüllt.
Üben Sie einen Überdruck aus, um ein Verstopfen der Pipette zu verhindern, führen Sie ihn in die Netzhaut ein und reduzieren Sie dann den Druck, um Gewebeschäden zu vermeiden.
Schieben Sie die Pipette in Richtung der Starburst-Amakrinzellen (SACs), die synaptisch mit anderen Neuronen verbunden sind.
Nähern Sie sich einer Zelle, bis sich ein Grübchen auf ihrer Membran bildet. Lassen Sie den Druck ab, damit die Membran an der Spitze haften kann.
Verwenden Sie einen negativen Strom, um ein Membranpflaster in die Pipette zu ziehen.
Wenden Sie einen Sog an, um die Membran zu durchbrechen, um die Kontinuität zwischen der Elektrode und dem Zellzytoplasma herzustellen, eine Technik, die als Ganzzell-Patch-Clamp bezeichnet wird.
Um synaptische Ströme aufzuzeichnen, legen Sie eine Spannung an, um das Membranpotential des SAC konstant zu halten.
Die Neurotransmitter, die von synaptisch verknüpften Neuronen freigesetzt werden, löse
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