JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:10 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer Verhaltensaufzeichnungskammer, die eine anästhesierte, transgene Zebrafischlarve enthält, die in einer niedrigschmelzenden Agarose immobilisiert ist.
Die Prätectum-Region des Mittelhirns der Larve und der untere Lappen des Hypothalamus enthalten modifizierte Neuronen, die fluoreszierende Kalziumindikatoren exprimieren.
Entfernen Sie die Agarose um den Kopf der Larve und waschen Sie sie mit Wasser, um Agarosereste zu entfernen.
Platzieren Sie ein Pantoffeltierchen als Beute in der Nähe der Larve.
Übertragen Sie die Aufnahmekammer unter ein Fluoreszenzmikroskop.
Während die Beute schwimmt, erkennt das Auge der Larve sie und sendet ein Signal an die Regionen des Prätektums und des Hypothalamus, die an der Beuteerkennung beteiligt sind.
Dadurch werden Kalziumkanäle in diesen Neuronen geöffnet, wodurch Kalziumionen in die Kalziumindikatoren eindringen und an diese binden können, was zu einer Fluoreszenzemission führt.
Nehmen Sie die Zeitraffer-Bildgebung auf, um die Fluoreszenzintensität von Neuronen entlang des Schwimmwegs der Beute zu erkennen und eine Farbkarte zu erstellen.
In dieser Karte stellen Pfeilspitzen die Flugbahnen der Beute dar: Schwarze Pfeile zeig
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