Vorbereitung eines Rattenmodells zur Beurteilung der Integrität der Sehbahn unter Verwendung eines elektrophysiologischen Aufbaus

Licht stimuliert die Photorezeptoren des Auges und sendet elektrische Signale an den visuellen Kortex im Gehirn, um visuelle Informationen zu verarbeiten.

Um die Integrität dieser visuellen Bahn zu messen, beginnen Sie mit einer anästhesierten, dunkelangepassten Ratte in einem dunklen Raum.

Positionieren Sie eine Referenz-VEP-Elektrode um die unteren Vorderzähne der Ratte.

Sichern Sie die Ratte mit einem Befestigungsstreifen auf einer ERG-Plattform vor einer Ganzfeld-Schüssel, einer Lichtbeleuchtungsvorrichtung in einem Faradayschen Käfig.

Platzieren Sie die Referenz-ERG-Elektroden um den Äquator des Auges, umgeben Sie den Skleralring, und befestigen Sie sie.

Befestigen Sie dann die aktiven VEP-Elektroden an den vorimplantierten Schädelschrauben, um kortikale Signale zu erkennen.

Positionieren Sie die ERG-Elektroden mit Gleitgel in der Mitte der Augen, um ihre Reaktionen auf Lichtreize zu messen.

Entfernen Sie überschüssiges Schmiermittel und führen Sie eine Masseelektrode in das Heck ein, um elektrisches Rauschen zu reduzieren.

Bewegen Sie die ERG-Plattform näher an die Ganzfeld-Schüssel und schließen Sie den Faradayschen Käfig, um externe Störungen zu minimieren.

Bei skotopischen Aufnahmen werden alle Eingriffe in einer Dunkelkammer durchgeführt. Zur Veranschaulichung wird hier die Elektrodenpositionierung unter normaler Raumbeleuchtung durchgeführt. Das Tier wurde 12 Stunden lang an die Dunkelheit angepasst und mit Ketamin und Xylazin betäubt.

Nach der Pupillenerweiterung und der topischen Anästhesie haken Sie die inaktive EP-Elektrode um die unteren Schneidezähne ein. Platzieren Sie das Tier dann auf der ERG-Plattform vor der Ganzfeld-Schüssel, die sich im Faradayschen Käfig befindet. Befestigen Sie das Tier mit einem Klettband auf der Plattform, der fest, aber nicht fest um den Nacken gelegt wird.

Positionieren Sie anschließend die ERG-inaktiven Elektroden, indem Sie den Skleralring nicht-invasiv um den Äquator des Auges herum umkreisen, etwa drei Millimeter hinter dem Limbus. Stabilisieren Sie diesen, indem Sie die Elektroden an der Klettleiste um den Nacken befestigen. Wiederholen Sie den Vorgang für das kontralaterale Auge.

Befestigen Sie nun die VEP-aktiven Elektroden, indem Sie Krokodilklemmen an den am Schädel vorimplantierten Edelstahlschrauben befestigen. Geben Sie vor der Platzierung der ERG-aktiven Elektrode einen kleinen Tropfen 1 % Carboxymethylcellulose-Natrium auf die Elektrode, um die Signalqualität zu verbessern. Positionieren Sie die ERG-aktiven Elektroden so, dass sie die zentrale Hornhautoberfläche leicht berühren, indem Sie einen Mikromanipulator verwenden, der an dem speziell angefertigten stereotaktischen Arm befestigt ist.

Stellen Sie sicher, dass das Carboxymethylcellulose-Natrium nur mit der Hornhaut und nicht mit der Sklera in Kontakt kommt, indem Sie überschüssige Flüssigkeit abwischen. Führen Sie dann 2 bis 5 Millimeter der geschliffenen Nadelelektrode aus Edelstahl subkutan in den Schwanz ein. Schieben Sie die Plattform näher an die Ganzfeld-Schale heran und stellen Sie sicher, dass die Augen des Tieres mit der Öffnung der Schüssel ausgerichtet sind, um eine gleichmäßige Ausleuchtung beider Netzhäute zu ermöglichen.

Schließen Sie anschließend den Faradayschen Käfig, um Fremdgeräusche zu reduzieren.