Implantation von Elektroden in einen Mauskortex für elektrokortikographische Aufzeichnungen

Nehmen wir eine betäubte Maus, deren Schädel auf einem stereotaktischen Rahmen freigelegt ist. Dieser Maus wurde ein Virus injiziert, das das mutierte Aktin-trennende Protein in die rechte Großhirnrinde exprimiert.

Schrauben Sie eine elektrokortikographische Elektrode in die Injektionsstelle.

Markieren und bohren Sie den Schädel senkrecht für die hintere Elektrode, die Referenzelektrode und die Wartungsschrauben.

Desinfizieren Sie die Stellen mit einem Antiseptikum und blockieren Sie sie, um Blutungen zu vermeiden.

Setzen Sie die Schrauben und Elektroden in den gleichen Bohrwinkeln ein und tragen Sie Zahnzement auf den Zwischenraum auf.

Verwenden Sie nun Licht, um den Zement zu verfestigen.

Bedecken Sie die Basen der Elektroden und Schrauben mit Zahnzement und tragen Sie erneut Licht auf. Sichern Sie die Montage mit Acrylzement. Naht die Haut.

Verbinden Sie die Golddrähte der Elektroden mit den Anschlussstiften.

Decken Sie den Steckerraum mit Acrylzement ab.

Lassen Sie die Maus wiederherstellen. Zeichnen Sie nach der Genesung die Signale der Großhirnrinde als Reaktion auf die Virusinjektion auf.

Für die Elektrodenimplantation schrauben Sie mit einer geraden Kelly-Pinzette langsam eine elektrokortikographische Elektrode mit einem geraden Golddraht in die vertikale Achse des Lochs, in das das AAV injiziert wurde, und lassen Sie mindestens 2,5 Millimeter Schraube außerhalb des Schädels, um die Schädigung der Dura und der Großhirnrinde zu minimieren.

Markieren Sie mit einem Stift die Position der Referenzelektrode 2,6 Millimeter lateral rechts zur Mittellinie und 0,7 Millimeter posterior zum Bregma und die Position der posterioren elektrokortikographischen Elektrode 1,5 Millimeter lateral rechts zur Mittellinie und 1,5 Millimeter vor dem Lambda sowie die Positionen von drei Wartungsschrauben auf der linken Hemisphäre ohne spezifische Koordinaten. aber so weit wie möglich voneinander und von den elektrokortikographischen Elektroden entfernt.

Verwenden Sie den Bohrer, um den Schädel vorsichtig senkrecht zur Schädeloberfläche an den markierten Positionen der anderen Elektroden und Schrauben zu durchstechen und waschen Sie den durchstochenen Schädel mit einer 10%igen Povidon-Jod-Lösung.

Blockieren Sie die Löcher mit kleinen gerollten Stücken eines Feinwaschtuchs, bevor Sie die Schrauben einsetzen, um Bluten und Kontamination zu vermeiden, und führen Sie die Schrauben mit einer geraden Kelly-Pinzette im gleichen Winkel in die Bohrlöcher ein, in dem die Löcher durchstochen wurden. Geben Sie ein paar kleine Tropfen Zahnzement in die Mitte des ringförmigen Raums im Inneren der Schrauben. Nachdem Sie die Augen des Tieres bedeckt haben, wenden Sie drei bis fünf Minuten lang Licht an, um den Zement zu verfestigen, und verwenden Sie zusätzlichen Zahnzement, um die Basis der elektrokortikographischen Elektroden zu bedecken, und die Ankerschrauben, um eine kronenförmige Kontur zu bilden.

Nachdem Sie weitere drei bis fünf Minuten Licht angewendet haben, füllen Sie die Mitte der Montage mit Acrylzement und entfernen Sie die chirurgischen Klammern.

Verwenden Sie eine synthetische, resorbierbare monofile Naht, um die Haut an der Vorder- und Rückseite der Montage zu schließen, so dass der Schädel nicht freiliegt, und halten Sie den Konnektor mit einer gebogenen Pinzette über der Montage, um die Golddrähte der Elektroden vorsichtig mit den Verbindungsstiften auszurichten. Löten Sie dann schnell jedes Elektrodenende an einen einzelnen entsprechenden Anschlussstift.

Nachdem Sie die Maus aus dem Rahmen genommen haben, decken Sie den leeren Raum zwischen dem Stecker und dem Kopf mit dem Acrylzement ab und stellen Sie die Maus nach dem Wiegen in einen sauberen Käfig mit einem nicht vernetzten Deckel auf einem Heizkissen.