Induktion axonaler Varizen mit einem mikromechanischen Stimulus auf Neuronen

Beginnen Sie damit, eine Mikropipette mit angeschlossenem Schlauch an einem Mikromanipulator zu befestigen.

Befestigen Sie das andere Ende des Schlauchs über einen Anschluss mit drehbarem Ventil an einer mit einem Salzpuffer gefüllten Spritze.

Stellen Sie die Spritze in einer Höhe ein, die genügend Druck ausübt, um Krampfadern in den Axonen auszulösen.

Axonale Varizen sind perlenartige Schwellungen, die entlang der Länge eines Axons auftreten.

Positionieren Sie die Mikropipette im gewünschten Winkel relativ zur Kulturschale.

Verwenden Sie das Fluoreszenzlicht des Mikroskops, um die Spitze der Mikropipette auszurichten und sie in der Nähe der Oberfläche der Zellkulturschale mit Salzpuffer abzusenken.

Schalten Sie nun das Durchlicht ein und schalten Sie den Leuchtstofffilter aus.

Lege ein Deckglas mit Neuronen auf die Schale.

Fokussieren Sie sich zunächst auf die Mikropipette und passen Sie ihre Position an.

Konzentrieren Sie sich dann auf die Region, in der sich die Zielneuronen befinden.

Öffnen Sie das Ventil, um den Flüssigkeitsdruck aufrechtzuerhalten. Dieser mikromechanische Reiz induziert Krampfadern in diesen Neuronen.

Führen Sie bei diesem Verfahren die Pipette in den Schraub