Etablierung einer Ganzzell-Voltage-Clamp-Konfiguration für elektrophysiologische Aufzeichnungen in Hirnschnitten

Nehmen Sie eine Aufzeichnungspipette mit einer Drahtelektrode in eine Elektrolytlösung.

Positionieren Sie die Pipette über einer immobilisierten Hirnscheibe.

Passen Sie den Pipettenstrom an, um Hintergrundsignale zu reduzieren.

Verwenden Sie ein Mikroskop, um das Zielneuron zu lokalisieren, und bewegen Sie die Pipette in Richtung des Neurons.

Üben Sie einen leichten Überdruck aus und verriegeln Sie ihn.

Der Überdruck stört die Gewebeoberfläche, was auf die Nähe zur Zelle hinweist.

Bringen Sie die Pipette näher heran, bis sich ein Grübchen auf der Membran bildet, das die korrekte Positionierung anzeigt.

Lassen Sie den Überdruck ab.

Beobachten Sie eine Zunahme des Widerstands, wenn die Zelle mit der Pipette eine Versiegelung bildet.

Halten Sie das Membranpotential zur Stabilität auf einer konstanten negativen Spannung.

Ziehen Sie die Mikropipette weg, um den überschüssigen Druck zu entfernen.

Passen Sie die schnellen und langsamen elektrischen Reaktionen der Pipette für Genauigkeit an.

Üben Sie einen kurzen Sog aus, um die Zelle zu durchbrechen und eine direkte elektrische Verbindung herzustellen.

Die Ganzzellen-Spannungsklemmenkonfiguration ist nun bereit für die elektrophysiologisc