JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:10 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem elektrophysiologischen Aufbau, der einen Vorderhirnschnitt der Maus enthält, der in einen sauerstoffhaltigen aCSF getaucht ist.
aCSF enthält einen Ionenkanalblocker, der selektiv die Natrium-Ionen-Kanäle hemmt und so eine natriuminduzierte neuronale Erregung verhindert.
Die kortikalen Neuronen exprimieren fluoreszierende Glutamat-Nachweis-Sensorproteine.
Lokalisieren Sie ein einzelnes präsynaptisches Neuron axonales Bouton, das in der Lage ist, Glutamat, einen exzitatorischen Neurotransmitter, an der Synapse freizusetzen, einer Verbindung, an der es mit postsynaptischen Neuronen verbunden ist.
Positionieren Sie eine Stimulationselektrode in der Nähe dieses Boutons und legen Sie Depolarisationsströme an.
Dies regt das präsynaptische Neuron an, was zu einem Einstrom von Kalziumionen führt und die Freisetzung von Glutamat erleichtert.
Starten Sie die Aufzeichnung der Fluoreszenzintensität um den ausgewählten Bouton.
Das freigesetzte Glutamat interagiert mit den Sensorproteinen und Rezeptoren auf postsynaptischen Neuronen.
In der Zwischenzeit wird der ausgewählte Bereich mit Laserlicht beleuchtet, wodurch die Glutamat-gebundenen Sensorproteine fluoreszieren; eine
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