JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 6:22 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir den abgetrennten Kopf einer gentechnisch veränderten Maus. Das olfaktorische Epithel in seiner Nase enthält olfaktorische sensorische Neuronen (OSNs) mit Fluorophor-markierten Geruchsrezeptoren.
Entfernen Sie die Haut und präparieren Sie den Kopf, um das Septum mit angehängtem Riechepithel zu isolieren.
Trennen Sie das Epithel und sichern Sie es in einer Aufnahmekammer.
Erkennen Sie mit einem Fluoreszenzmikroskop die markierten Rezeptoren, um den dendritischen Knopf der OSNs zu erreichen.
Bringen Sie eine Aufnahmepipette mit einer intrazellulären Lösung mit, die Nystatin enthält, ein membranperforierendes Antibiotikum.
Üben Sie Überdruck aus, um ein Verstopfen der Pipette zu vermeiden. Führen Sie die Pipette in das Epithel ein und nähern Sie sich einem OSN.
Schalten Sie auf Unterdruck um und bilden Sie eine Abdichtung mit der Zellmembran. Wenden Sie Strom an, um die Membran auf dem Ruhepotential zu halten.
Nystatin perforiert die Membran und ermöglicht so die Messung intrazellulärer Ionenströme.
Positionieren Sie eine Pipette mit einem Geruchsstimulans in der Nähe des OSN. Setzen Sie das Stimulans frei, das an die Geruchsrezeptoren bindet und die Öffnung der Ionenkanäle
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos