Aufzeichnung der neuronalen Aktivität in frei beweglichen Mäusen mittels Faserphotometrie
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:27 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer frei beweglichen Maus mit einer implantierten Glasfaserkanüle.
Verbinden Sie ein Ende eines Glasfaser-Patchkabels mit der Kanüle und das andere Ende mit einer Anregungslichtquelle.
Die Maus exprimiert einen grünen, mit Fluorophoren markierten genetisch kodierten Kalziumindikator (GECI) im lateralen hypothalamischen Bereich oder LHA-Neuronen.
Die implantierte optische Faser berührt die laterale Habenula oder LHb-Region, wo die LHA-Axone enden.
Stimulieren Sie den GECI bei seiner optimalen Anregungswellenlänge und zeichnen Sie das Basissignal auf.
Wenden Sie nun wiederholte Luftstöße auf die Maus an, um eine aversive Stressreaktion hervorzurufen.
Dieser Stimulus löst Aktionspotentiale in LHA-Axonterminalien aus, öffnet spannungsgesteuerte Kalziumkanäle und ermöglicht den Kalziumeinfluss.
Intrazelluläre Kalziumionen binden an den GECI und induzieren eine Konformationsänderung, die die grüne Fluoreszenzemission erhöht.
Visualisieren Sie das optische Signal.
Eine erhöhte Fluoreszenz als Reaktion auf Luftstöße in der Maus bestätigt die Rolle des LHA-LHb-Signalwegs bei der Übertragung aversiver Signale.
Beginnen Sie damit, das distale Ende der Fasern des Patchkabels
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