JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:05 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie ein immobilisiertes transfiziertes Maushirnschnitt in einer elektrophysiologischen Aufzeichnungskammer, die mit sauerstoffreichem aCSF durchblutet ist.
Diese Scheibe enthält die Axonenden der Thalamusneuronen, die lichtempfindliche Ionenkanäle exprimieren, die mit einem fluoreszierenden Protein fusioniert sind.
Visualisieren Sie die fluoreszierenden Axone des Thalamusneurons und wählen Sie ein pyramidales Neuron aus.
Eine Aufzeichnungspipette, die eine Elektrode in einer intrazellulären Lösung enthält, wird mit leichtem Überdruck in Richtung des ausgewählten Neurons vorgeschoben.
Durch den Überdruck entsteht bei Kontakt ein Grübchen auf der neuronalen Membran.
Lassen Sie den Druck ab, um eine hochfeste Dichtung zu bilden.
Stellen Sie das Membranpotential auf einen konstanten negativen Wert ein.
Wenden Sie einen Unterdruckimpuls an, um die Membran zu durchbrechen und eine Ganzzellenkonfiguration zu erreichen.
Beleuchten Sie die Axonendigungen, aktivieren Sie die lichtempfindlichen Kanäle und depolarisieren Sie die neuronalen Membranen, wodurch Aktionspotentiale ausgelöst werden.
Exzitatorische Neurotransmitter werden freigesetzt und binden an Rezeptoren auf dem aufgezeich
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