JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:09 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer immobilisierten, anästhesierten Ratte mit einer Aktivkohle-Mikroelektrode, die in den Nucleus accumbens oder die NAc-Region implantiert wurde, und einem Referenzdraht in der linken Hemisphäre.
Diese Elektroden sind mit einem Potentiostaten verbunden, der die von Dopamin erzeugten elektrischen Signale misst.
Eine Stimulationselektrode mit einer Führungskanüle wird in den ventralen tegmentalen Bereich (VTA) implantiert und zielt auf dopaminerge Neuronen ab, die in die NAc-Region projizieren.
Wenden Sie über die Stimulationselektrode elektrische Impulse an, die die VTA-Neuronen aktivieren und Dopamin, einen chemischen Botenstoff, in die NAc-Region freisetzen.
In der NAc-Region interagiert Dopamin mit der Kohlenstoffelektrode und durchläuft eine Oxidation und Reduktion, wodurch elektrische Signale erzeugt werden.
Führen Sie eine interne Kanüle in die Führungskanüle ein, um entweder einen Aktivator oder ein Inhibitor zu infundieren.
Das Aktivator-Medikament stimuliert die VTA-Neuronen, erhöht die Dopaminfreisetzung und erhöht die elektrischen Signale.
Im Gegensatz dazu verringert das hemmende Medikament das elektrische Signal, indem es die Dopaminfreisetzung verhindert.
Stimulieren Sie das Tier alle drei Minuten für 20 bis 30 Minuten. Nachdem Sie eine stabile Ausgangsbasis erreicht haben, senken Sie die innere Kanüle vorsichtig von Hand in die Führungskanüle ab, die zuvor in den bipolaren Stimulator eingesetzt wurde, und machen Sie zwei bis drei zusätzliche Basisaufnahmen, um zu bestätigen, dass das Einführen der Kanüle keine Veränderung des evozierten Signals verursacht hat.
Sobald ein Ausgangsansprechen festgestellt wurde, verwenden Sie eine Spritzenpumpe in einer Mikrospritze, um 0,5 Mikroliter der interessierenden Arzneimittellösung über einen Zeitraum von zwei Minuten in die VTA zu infundieren. Lassen Sie die innere Kanüle nach der Infusion mindestens eine Minute lang an Ort und Stelle, bevor Sie sie entfernen, und zeichnen Sie die Reaktion weiterhin alle drei Minuten auf, um die Auswirkungen nach der Infusion zu messen.