Elektrophysiologische Aufzeichnungen von reprogrammierten Neuronen in einer Maus-Gehirnscheibe

0 Aufrufe • 2:14 Min. • July 8th, 2025

Nehmen Sie einen immobilisierten, gentechnisch veränderten Maus-Koronalschnitt in einer Aufzeichnungskammer, die mit sauerstoffreichem Puffer durchblutet ist.

Die Scheibe enthält die striatale Region, in der Interneurone aus Oligodendrozyten-Vorläuferzellen reprogrammiert wurden, die durch einen Interneuron-Marker und die Expression fluoreszierender Proteine markiert sind.

Bauen Sie eine Aufzeichnungspipette zusammen, die aus einer Elektrode besteht, die in eine intrazelluläre Lösung getaucht ist.

Mikroskopische Identifizierung eines fluoreszierenden Interneurons.

Halten Sie einen positiven Druck in der Pipette aufrecht und schieben Sie es in Richtung des Zielinterneurons, wobei Sie die Membran berühren.

Üben Sie Unterdruck aus, um eine hochohmige Dichtung zu bilden.

Wenden Sie Unterdruckimpulse an, um die Membran zu durchbrechen und eine Ganzzellenkonfiguration herzustellen.

Halten Sie das Membranpotential des Interneurons auf einem konstanten negativen Wert.

Wenden Sie kurze inkrementelle Ströme an, öffnen Sie die Ionenkanäle und verändern Sie das Membranpotential, wodurch ein Aktionspotential ausgelöst wird.

Schließlich kehrt die Membran zum Ruhepotential zurück.

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