JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:37 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer betäubten, dunkel angepassten Ratte. Geben Sie eine Arzneimittellösung auf die Augen, um die Pupillen zu erweitern.
Dadurch gelangt mehr Licht auf die Netzhaut, die lichtempfindliche Schicht mit den Photorezeptoren.
Machen Sie einen Schädelschnitt, um präimplantierte Aufzeichnungsschraubenelektroden im visuellen Kortex des Gehirns und eine Referenzelektrode an der Mittellinie freizulegen.
Verbinden Sie eine der Schraubenelektroden des visuellen Kortex und die Referenzelektrode mit einem Verstärker zur Signalaufzeichnung.
Führen Sie als Nächstes eine Masseelektrode in den Schwanz ein, um elektrisches Rauschen zu reduzieren.
Positionieren Sie ein Lichtstimulationsgerät über dem Auge auf der der angeschlossenen Cortex-Schraubenelektrode gegenüberliegenden Seite und geben Sie dann die Lichtblitze ab.
Retinale Photorezeptoren erkennen das Licht und wandeln es in elektrische Signale um, die entlang des Sehnervs wandern und an den gegenüberliegenden visuellen Kortex weitergeleitet werden.
Im visuellen Kortex erkennt die präimplantierte Elektrode diese Signale und erzeugt die durch Lichtreize erzeugte elektrische Ausgabe, die als visuell evozierte Potentiale oder VEPs bezeichnet wird.
Nachdem Sie das Tier betäubt und die Haut wie zuvor vorbereitet haben, bringen Sie es in einen dunklen Raum. Dort halten Sie ihre Körpertemperatur mit einem homöothermen Deckensystem und einem Temperaturfühler innerhalb eines halben Grades von 37 Grad Celsius. Während der Überwachung, passen Sie das Tier 5 bis 30 Minuten lang an die Dunkelheit an.
Nach einer halben Stunde erweitern Sie die Pupillen mit 1% Tropicamid Augentropfen. Öffnen Sie dann mit einer Schere und einer Pinzette die Haut über dem Schädel und greifen Sie auf die vorplatzierten In-situ-Schraubenelektroden zu. Verbinden Sie die Schrauben mit dem Impedanzmessgerät. Messen Sie dann die Elektrodenimpedanz und halten Sie sie unter 5 Kiloohm.
Verbinden Sie nun die Schraube über dem kontralateralen visuellen Kortex des stimulierten Auges. Führen Sie als Nächstes eine Nadelelektrode in den Schwanz ein, die als Boden dient. Platzieren Sie nun einen kalibrierten Mini-Ganzfeld-Stimulator auf der Haut um die Augenlider, um die Isolierung der Augen zu verbessern. Liefern Sie dann eine photische Stimulation mit 100 Blitzen bei 1 Hertz, mit dem Tiefpassfilter bei 1 Hertz und dem Hochbandpassfilter bei 100 Hertz.