Aufzeichnung des lokalen Feldpotentials aus beiden Hemisphären des Mausgehirns

Beginnen Sie mit einer betäubten Maus, deren Kopf in einem stereotaktischen Rahmen befestigt ist.

Rasieren und sterilisieren Sie die Kopfhaut.

Machen Sie einen Schnitt und entfernen Sie das restliche Gewebe, um den Schädel freizulegen.

Reinigen Sie den Schädel mit einem Desinfektionsmittel und bohren Sie Löcher an den Zielstellen.

Entfernen Sie die äußere Schicht des Gehirns.

Führen Sie mit einer ionischen Lösung gefüllte Mikroelektroden in einem gewünschten Winkel in die Löcher ein.

Senken Sie beide Mikroelektroden in die Zielkoordinaten des Gehirns ab.

Testen Sie den Widerstand der Elektroden und passen Sie die Aufzeichnungseinstellungen an, um eine zuverlässige Erfassung des lokalen Feldpotentials oder der LFP-Daten zu gewährleisten.

LFP spiegelt Spannungsänderungen wider, die sich aus der kollektiven Aktivität vieler Neuronen innerhalb einer kleinen Region ergeben.

Nehmen Sie LFPs von beiden Hemisphären auf, um die neuronale Aktivität zwischen ihnen zu vergleichen.

Bestätigen Sie vor der Operation die Narkosetiefe der Maus, indem Sie mit einer Pinzette in den Schwanz oder Zeh kneifen. Positionieren Sie als Nächstes die Maus in einem stereotaktischen Gerät und fixieren Sie ihren Kopf. Tragen Sie Salbe auf beide Augen auf, um sie feucht zu halten.

Rasieren Sie dann den Kopf und sterilisieren Sie den Bereich. Machen Sie einen kleinen Schnitt von 12 bis 15 Millimetern in der Mitte des rasierten Bereichs. Ziehen Sie die Kopfhaut mit einer Pinzette vorsichtig von der Mittellinie weg. Trennen Sie anschließend die Haut vorsichtig und entfernen Sie das restliche Gewebe.

Reinige den Schädel mit Wasserstoffperoxid-beschichteten Wattestäbchen. Bohren Sie unter einem Stereomikroskop zwei kleine Löcher mit einem Radius von 1 bis 1,5 Millimetern sowohl auf der linken als auch auf der rechten Seite des Schädels, um das Einführen der Aufzeichnungsmikroelektroden in die M2-Bereiche zu ermöglichen.

Entfernen Sie vorsichtig die Dura mater mit einer Wolframnadel und führen Sie dann mit mechanischen Mikromanipulatoren zwei separate, mit 0,5 molar Natriumchlorid gefüllte Aufzeichnungsmikroelektroden in einem Winkel von 60 Grad in die Löcher ein.

Für die LFP-Aufnahme senken Sie die linke und rechte Glaselektrode langsam auf die M2-Koordinaten ab. Zur Qualitätskontrolle testen Sie den Widerstand jeder Elektrode mit dem Differenzverstärker. Stellen Sie anschließend den Aufnahmeprozess auf 0,1 Hertz Hochpass und 1.000 Hertz Tiefpass mit 1.000-facher Verstärkung ein. Sammeln Sie die digitalisierten LFP-Rohdaten in stabilem Zustand für mindestens 60 Sekunden, wobei die Maus unter Narkose gleichmäßig mit zwei Atemzügen pro Sekunde atmet.