Analyse des Schlafverhaltens bei Mäusen durch Elektroenzephalogramm und Elektromyogramm-Aufzeichnungen

Befestigen Sie eine betäubte Maus auf einem stereotaktischen Rahmen.

Desinfizieren Sie die rasierte Haut, bedecken Sie die Maus mit einem Tuch und machen Sie einen Schnitt in der Mittellinie, um den Schädel freizulegen.

Bohren Sie zwei Löcher in den Schädel an bestimmten stereotaktischen Koordinaten.

Bereiten Sie eine Aufzeichnungselektrodeneinheit mit einer vierpoligen Stiftleiste vor, die an Edelstahldrähte angeschlossen ist.

Verwenden Sie zwei Drähte mit Schrauben als Elektroenzephalogramm oder EEG-Elektroden, um die elektrische Aktivität des Gehirns zu messen.

Verwenden Sie die anderen beiden Drähte als Elektromyogramm oder EMG-Elektroden, um die elektrische Aktivität der Muskeln zu messen.

Schrauben Sie die EEG-Elektroden in die Löcher und befestigen Sie die Elektrodenanordnung am Schädel.

Führen Sie die EMG-Elektroden in die Nackenmuskulatur ein.

Schließen Sie den Schnitt mit Nähten und lassen Sie die Maus sich erholen.

Bringen Sie die Maus in eine schalldichte Aufnahmekammer.

Verbinden Sie die Elektrodeneinheit mit einem Aufnahmekabel und verbinden Sie sie mit einem Verstärker.

Zeichnen Sie die EEG- und EMG-Signale auf, um verschiedene Schlafstadien und Wachheit bei Mäusen zu analysieren.

Bevor Sie beginnen, sterilisieren Sie alle chirurgischen Instrumente in einem Heißperlensterilisator. Sobald die Maus durch ein Zehenkneifen als betäubt bestätigt wurde, rasieren Sie die Haare an Kopf und Hals ab.

Befestigen Sie als Nächstes die Maus am stereotaktischen Rahmen und befestigen Sie den Kopf zwischen den beiden Ohrstangen. Tragen Sie dann eine Augensalbe auf die Augen auf, um Trockenheit zu vermeiden. Fahren Sie mit der Reinigung der rasierten Haut mit Peelings auf Alkohol- und Jodbasis fort.

Schneiden Sie dann mit einem Skalpell entlang der Mittellinie, um den Schädel freizulegen, und befestigen Sie die Haut mit Klammern an der Seite, um den Operationsbereich offen zu halten. Machen Sie mit einem Hartmetallfräser mit einem 0,8-Millimeter-Bohrer zwei Löcher. Setze ein Loch über den frontalen kortikalen Bereich. Legen Sie das zweite Loch über den parietalen Bereich der rechten Hemisphäre.

Schrauben Sie anschließend mit einem Juwelierschraubendreher EEG-Aufzeichnungsschrauben aus Edelstahl in die Löcher. Setzen Sie die Schrauben mit nur zwei bis zweieinhalb Umdrehungen ein, um eine epidurale Positionierung über der Rinde zu erhalten. Die Schrauben sollten nach dem Einsetzen nicht wackeln. Das ist sehr wichtig.

Befestigen Sie nun die Elektrodeneinheit mit den Stiften nach oben am Schädel. Die Elektroden müssen gerade angebracht werden. Verwenden Sie ein Wattestäbchen, um die Position der Elektroden zu sichern, und kleben Sie die Elektrode mit Cyanacrylat fest, gefolgt von Zahnzement.

Als nächstes bohren Sie kleine Löcher in den Trapezius und führen Sie die EMG-Elektrode in diese Löcher ein. Nähen Sie dann die Haut mit Seidenfaden mit einem Durchmesser von 0,1 Millimetern. Entfernen Sie nun die Maus aus dem stereotaktischen Rahmen und legen Sie sie auf ein Wärmekissen.

Geben Sie der Maus intraperitoneale Injektionen von Ampicillin und Meloxicam und überwachen Sie die Maus, bis sie wieder sternale Liege erreicht. Beherbergen Sie dann die Maus alleine.

Eine Woche nach der Implantation der Elektroden bringen Sie die Maus in einen Versuchskäfig in einer schalldichten Aufnahmekammer. Befestigen Sie die EEG/EMG-Elektrodenbaugruppe an der Maus an einem Aufzeichnungskabel, das mit einem Schleifring verbunden ist.

Verbinden Sie das AD-Wandlerkabel mit einem EEG/EMG-Signalfilterverstärker, der mit dem Schleifring verbunden ist. Verwenden Sie einen AD-Wandler, um das Signal in ein digitales 128-Hertz-Signal umzuwandeln und schließlich das Signal auf einem Computer aufzuzeichnen.

Gewöhnen Sie die Maus für zwei bis drei Tage in der Aufnahmekammer. Starten Sie die EEG/EMG-Aufzeichnungssoftware. Um zu beginnen, klicken Sie auf die Registerkarte Datendateiinformationen und klicken Sie auf das Kästchen neben dem Dateinamen. Geben Sie einen Dateinamen ein und klicken Sie auf Speichern. Wählen Sie dann auf der Registerkarte "Aufnahmebedingungen" alle EEG/EMG-Kanäle aus, die aufgezeichnet werden sollen. Wählen Sie außerdem die Sampling-Häufigkeit auf dieser Registerkarte aus.

Überprüfen Sie nun auf der Registerkarte "Kanalinformationen", ob die ausgewählten Kanäle richtig angezeigt werden. Starten Sie nach der Bestätigung den Datensatz, indem Sie zuerst die Registerkarte "Timer-Einstellungen" auswählen. Klicken Sie dann auf Überwachen, um EEG und EMG anzuzeigen. Wenn die Signale korrekt angezeigt werden, stellen Sie die Uhrzeit für den Beginn und das Ende der Aufnahme im Haupt-Timer-Bereich ein. Klicken Sie dann auf die Monitor-Schaltfläche, um die Aufnahme zu starten.