JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:27 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie Hippocampus-Hirnschnitte der Maus, die CA3-Neuronen enthalten, die mit einem rekombinanten viralen Vektor infiziert sind.
Das virale Genom exprimiert einen lichtaktivierten Kanal, der mit einem fluoreszierenden Reporter und einer microRNA markiert ist, die die Expression von spannungsgesteuerten Kalziumkanälen herunterreguliert
.Platzieren Sie ein Slice unter dunklen Bedingungen in einer Aufnahmekammer. Identifizieren Sie mit einem Mikroskop die fluoreszierenden CA3-Neuronen.
Platzieren Sie eine Aufzeichnungselektrode auf einem CA1-Neuron, das Eingaben von infizierten CA3-Neuronen empfängt. Brechen Sie die Membran, um intrazelluläre Ionenströme aufzuzeichnen.
Wenden Sie einen Inhibitor an, um inhibitorische Neurotransmitterrezeptoren zu blockieren, so dass nur erregende Signale gesendet werden können.
Stimulieren Sie mit Lichtimpulsen die lichtaktivierten Kanäle in den infizierten CA3-Neuronen und erzeugen so Aktionspotentiale.
Bei nicht infizierten Mäusen aktiviert das Aktionspotential spannungsgesteuerte Kalziumkanäle, was zu einem Kalziumioneneinstrom führt, der die Freisetzung von Neurotransmittern auslöst. Die Neurotransmitter lösen exzitatorische postsynaptische St
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