JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:38 Min. • July 8th, 2025
Immobilisiere einen betäubten Rattenwelpen in einer Schaumstoffform.
Positionieren Sie den Welpen auf einem schwingungsdämpfenden Tisch in einem schalldichten Raum, um Vibrationen und geräuschbedingte Artefakte zu minimieren. Lege ein Heizkissen darunter, um die Körpertemperatur zu halten.
Sterilisieren Sie den Kopf.
Machen Sie Schnitte in der Nähe der Außenohren, um die Referenz- und Masseelektroden zu platzieren.
Führen Sie anschließend die Aufzeichnungselektrode unter der Haut am Schädelscheitel ein.
Verwenden Sie einen Lautsprecher, der an einen Klangerzeuger angeschlossen ist, um Schallimpulse unterschiedlicher Frequenzen und Intensitäten abzugeben.
Die mechanischen Schwingungen der Schallimpulse lenken die Haarzellvorsprünge im Innenohr der Ratte ab.
Diese Ablenkung öffnet mechanisch gesteuerte Ionenkanäle, was zu einem positiven Ioneneinstrom und einer Depolarisation der Haarzellen führt.
Die depolarisierten Haarzellen setzen Neurotransmitter frei, die an die neuronalen Rezeptoren des Innenohrs binden und so Aktionspotentiale erzeugen.
Die Aktionspotentiale breiten sich über den Hörnerv in den Hirnstamm aus.
Die Aufzeichnungselektrode erfasst das Signal, das ein Prozessor in die auditive Hirnstammantwort umwandelt.
Um diesen Vorgang zu beginnen, legen Sie das betäubte Tier in eine Form aus Polyethylenschaum, um den Körper des Tieres bewegungsunfähig zu machen. Stellen Sie das Tier dann auf eine Antivibrationsliege in einem schalldämpfenden Raum. Halten Sie die Körpertemperatur des Tieres mit einem Heizkissen auf 37,5 Grad Celsius.
Wischen Sie anschließend den Kopfbereich mit 70% Ethanol ab. Machen Sie einen 1 bis 2 Millimeter großen Schnitt ventrolateral zur äußeren Ohrmuschel, um die Referenzelektrode oder Erdungselektrode zu platzieren. Platzieren Sie dann eine subdermale Aufzeichnungselektrode über dem Schädelscheitel.
Erzeugen Sie mit dem Funktionsgenerator kalibrierte Tonausbrüche verschiedener Frequenzen und Intensitäten. Geben Sie die Schallreize über einen elektrostatischen Lautsprecher ab, der sich 10 Zentimeter vom Kopf des Tieres entfernt befindet.
Um die auditiven Hirnstammreaktionen zu erhalten, werden die vom Schall ausgelösten Potentiale mit Hilfe eines Multifunktionsprozessors gefiltert, verstärkt und gemittelt. Die 40-minütige ABR-Aufzeichnung wird online überwacht und für die Offline-Analyse gespeichert.