JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:58 Min. • July 8th, 2025
Sichern Sie eine wache Maus in einem stereotaktischen Rahmen, mit einem Silberdraht in ihrer Dura und einer Öffnung, die eine Gehirnregion freilegt, die auditive Reize verarbeitet.
Füllen Sie eine Arzneimittellösung in eine mehrläufige Glaspipette, die mit einer Wolframelektrode ausgestattet ist, und befestigen Sie sie an der stereotaktischen Rahmenhalterung.
Führen Sie unbeschichtete Silberdrähte in die Fässer ein und stellen Sie sicher, dass ein Ende die Lösung berührt, während das andere Ende mit einem Gerät verbunden ist, das die Wirkstofffreisetzung steuert.
Verbinden Sie den Pluspol und den Masseanschluss der Aufzeichnungsdrähte mit der Wolframelektrode bzw. dem Silberdraht, der die Dura kontaktiert.
Platzieren Sie die Multibarrel-Elektrode auf der Gehirnoberfläche und wenden Sie auditive Reize an.
Zeichnen Sie die neuronale Aktivität auf.
Wenden Sie anschließend einen positiven Strom an, um das Medikament freizusetzen.
Das Medikament dringt in das Gehirn ein und blockiert spezifische Rezeptoren, wodurch die Bindung von inhibitorischen Neurotransmittern verhindert und die neuronale Erregbarkeit erhöht wird.
Wenden Sie abschließend die auditiven Reize erneut an und identifizieren Sie die erhöhte neuronale Reaktion nach der medikamentösen Behandlung.
Legen Sie bei diesem Verfahren den Körper des Tieres in einen speziell angefertigten, mit Schaumstoff gepolsterten Fixbeutel. Befestigen Sie den Kopfpfosten an einer Halterung, die am stereotaktischen Rahmen befestigt ist. Dies ist ein guter Zeitpunkt, um dem Tier eine flüssige Belohnung zu geben. Decken Sie dann den Körper des Tieres mit einer Baumwolldecke ab und befestigen Sie sie locker mit einem Plastikhalbzylinder und Klebeband.
Verwenden Sie eine Spritze mit einer flexiblen Spitze, um die Fässer mit den ausgewählten Medikamenten zu füllen. Setzen Sie die mehrläufige Elektrode mit dem Mikromanipulator auf ihre Halterung. Lege als Nächstes einen unbeschichteten Silberdraht in jeden Zylinder, so dass ein Ende die Lösung berührt und das andere Ende zugänglich ist. Verbinden Sie dann diese Enden mit dem Mikroiontophoresegerät.
Verbinden Sie danach den Pluspol mit dem Ende der Wolframelektrode und den Erdungsanschluss mit dem Silberdraht, der die Dura kontaktiert. Bewegen Sie anschließend die mehrläufige Elektrode, bis die Spitze die Oberfläche des Gehirns berührt. Tragen Sie warme, sterile Kochsalzlösung auf, um das Austrocknen des Hirngewebes zu verhindern. Wenden Sie zu diesem Zeitpunkt einen Retentionsstrom an, um ein Austreten des Arzneimittels aus der Zylinderspitze zu vermeiden, während Sie nach Aktivität in einer Einheit suchen. Aufzeichnung der neuronalen Aktivität und der iontophoretischen Anwendung von Gabazin.