JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:17 Min. • July 8th, 2025
Ein Deckglas mit einer Co-Kultur wird in eine Aufnahmekammer gelegt, die mit einer sauerstoffhaltigen extrazellulären Lösung durchblutet ist.
Die Co-Kultur besteht aus Astrozyten, kortikalen Neuronen der Ratte, die lichtempfindliche Ionenkanäle exprimieren, die mit einem fluoreszierenden Protein fusioniert sind, und iPSC-abgeleiteten Neuronen, die ein anderes fluoreszierendes Protein exprimieren.
Identifizieren Sie mit einem konfokalen Mikroskop ein fluoreszierendes iPSC-abgeleitetes Neuron.
Schieben Sie eine mit einer intrazellulären Lösung gefüllte Aufnahmepipette in Richtung des Neurons, um eine Ganzzellkonfiguration zu etablieren.
Halten Sie ein konstantes negatives Membranpotential für genaue Strommessungen aufrecht.
Beleuchten Sie die Co-Kultur mit Licht, um lichtempfindliche Ionenkanäle in den kortikalen Neuronen zu aktivieren und dadurch ein Aktionspotential zu erzeugen.
Das Aktionspotential bewirkt die Freisetzung von Neurotransmittern in den synaptischen Spalt.
Wenn sie synaptisch verbunden sind, binden die Neurotransmitter an Rezeptoren auf dem gepatchten iPSC-abgeleiteten Neuron, öffnen Ionenkanäle und erzeugen postsynaptische Ströme.
Erhöhte postsynaptische Ströme in i
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos