JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:11 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie genetisch veränderte Co-Kulturen von Ventral-Hippocampus-Schnitten der Maus und Neuronen des Nucleus accumbens auf einem Deckglas.
Die Hippocampus-Neuronen projizieren präsynaptische Axonendigungen, die nikotinische Acetylcholinrezeptoren überexprimieren und Synapsen mit den Neuronen des postsynaptischen Nucleus accumbens bilden.
Neuronen sind mit einem Kalziumindikatorfarbstoff für intrazelluläre Kalziummessungen beladen.
Übertragen Sie das Deckglas in eine konfokale Mikroskopkammer, die mit einem Puffer durchblutet ist, der Kalziumionen enthält.
Nehmen Sie Fluoreszenzbilder der axonalen Projektionen des Hippocampus als Kontrolle auf.
Perfundieren Sie Nikotin, das an die nikotinischen Acetylcholinrezeptoren auf den Neuronen des Hippocampus bindet und den Kalziumeinstrom auslöst.
Die Kalziumionen binden an den intrazellulären Farbstoff und erhöhen so die Fluoreszenz.
Hippocampus-Axone setzen exzitatorische Neurotransmitter frei und initiieren die synaptische Übertragung in den Neuronen des Nucleus accumbens.
Mit Puffer waschen, um Nikotin zu entfernen.
Im Laufe der Zeit bewirkt die Aktivierung des nikotinischen Acetylcholinrezeptors eine Kalziumfreisetzung aus intrazellu
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