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Live-Imaging von Spinalganglien Axone nach Rhizotomie
Live-Imaging von Spinalganglien Axone nach Rhizotomie
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Neuroscience
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JoVE Journal Neuroscience
Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy

Live-Imaging von Spinalganglien Axone nach Rhizotomie

Full Text
14,313 Views
06:39 min
September 1, 2011

DOI: 10.3791/3126-v

Andrew Skuba1, B. Timothy Himes2,3, Young-Jin Son4

1Temple University,Shriners Hospitals Pediatric Research Center and Department of Anatomy and Cell Biology, 2Medical Research Service,Department of Veterans Affairs Hospital, 3Department of Neurobiology and Anatomy,Drexel University College of Medicine, 4Shriners Hospitals Pediatric Research Center and Department of Anatomy and Cell Biology,Temple University School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents an in vivo imaging protocol to monitor primary sensory axons following dorsal root crush. Utilizing wide-field fluorescence microscopy and thy1-YFP transgenic mice, the method allows for repeated imaging of axon regeneration over 4 cm in the PNS and their interactions with the CNS interface.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Regeneration
  • Imaging Techniques

Background

  • Understanding dorsal root regeneration is crucial for developing therapies for spinal root injuries.
  • The study utilizes YFP labeled positive axons for visualization.
  • Previous research has shown challenges in axon regeneration after spinal injuries.
  • Imaging techniques are essential for monitoring regeneration processes.

Purpose of Study

  • To investigate the mechanisms of dorsal root regeneration.
  • To explore methods for inducing significant axon regeneration post-injury.
  • To visualize the behavior of regenerating axons in real-time.

Methods Used

  • Spinal hemi laminectomy to expose the right L five dorsal root.
  • Careful crushing of the L five dorsal root to minimize bleeding.
  • Imaging of the crush site to confirm the position of the injured root.
  • Repeated imaging over time to assess axon regeneration into the spinal cord.

Main Results

  • Regenerating axons were observed to be rapidly immobilized at the dorsal root entry zone.
  • Imaging revealed the dynamics of axon behavior post-injury.
  • Results indicate challenges in axon movement into the CNS.
  • Data supports the need for further research into regeneration mechanisms.

Conclusions

  • The protocol effectively monitors axon regeneration in vivo.
  • Findings contribute to understanding spinal cord injury recovery.
  • Future studies may focus on enhancing axon regeneration techniques.

Frequently Asked Questions

What is the significance of this study?
This study provides insights into the mechanisms of axon regeneration after spinal injuries, which is crucial for developing therapeutic strategies.
How does the imaging protocol work?
The protocol uses wide-field fluorescence microscopy to visualize YFP labeled axons in real-time during the regeneration process.
What are the main challenges in axon regeneration?
Regenerating axons often face immobilization and difficulties entering the dorsal root entry zone, hindering recovery.
What animal model is used in this study?
Thy1-YFP transgenic mice are used for visualizing axon regeneration.
What is the purpose of the spinal hemi laminectomy?
The spinal hemi laminectomy exposes the dorsal root for visualization and intervention during the experiment.
How long is the regeneration monitored?
The regeneration is monitored over several time points to assess the progress of axon recovery.

Ein

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die Regeneration der dorsalen Wurzel zu untersuchen, um eine signifikante Regeneration nach Verletzungen der Wirbelsäulenwurzel zu induzieren. Dies wird erreicht, indem zunächst eine spinale Hemi-Laminektomie erstellt wird, die die rechte L-Fünf-Rückenwurzel freilegt und die Visualisierung von YFP-markierten positiven Axonen im Rückenmark und in der Rückenwurzel ermöglicht. Als nächstes wird die L-Fünf-Rückenwurzel vorsichtig zerkleinert, um eine minimale Blutung zu gewährleisten.

Nach dem Zerquetschen wird dann die Quetschstelle abgebildet, um die Position der verletzten dorsalen Wurzel in der Läsion zu überprüfen. Über mehrere Zeitpunkte werden die Verletzungsstelle und die dorsale Wurzeleintrittszone abgebildet, um die Fähigkeit der geschädigten Axone zu bestimmen, sich in das Rückenmark zu regenerieren. Letztendlich können Ergebnisse erzielt werden, die zeigen, dass regenerierende Axone schnell immobilisiert werden und stationär bleiben, wenn sie in die dorsale Wurzeleintrittszone oder DREZ eintreten.

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