Bewertung der anziehenden oder abstoßenden Aktivität von Proteinen mit Hilfe von Hippocampus-Neuronen

Beginnen Sie mit einer Schale, die eine Silikonmatrix enthält, die über mehrere kleine Kanäle verfügt, die mit den Einlass- und Auslassanschlüssen verbunden sind.

Injizieren Sie das Testprotein mit abstoßender Aktivität durch den Einlass, um die Kanäle zu füllen.

Inkubieren, um die Proteinadhärenz im Kanalbereich zu ermöglichen, Testproteinzonen bilden und dann waschen.

Entfernen Sie die Matrix, überlagern Sie die beschichtete Fläche mit einem Kontrollprotein mit attraktiver Aktivität und inkubieren Sie.

Dies erleichtert die Adhärenz des Kontrollproteins an den leeren Bereichen zwischen den Testproteinzonen, wodurch Kontrollproteinzonen mit einem abwechselnden Streifenmuster entstehen und dann gewaschen werden.

Fügen Sie Laminin hinzu, um den gestreiften Bereich zu beschichten, und waschen Sie ihn dann.

Besiedeln Sie den beschichteten Bereich mit einer einzelligen Suspension aus Hippocampus-Neuronen und inkubieren Sie.

In der Testproteinzone interagieren die Neuronen mit den Proteinen und lösen Signale aus, die dazu führen, dass sich die Neuronen abstoßen und ihre Anheftung hemmen.

Im Gegensatz dazu fördern Neuron-Protein-Interaktionen in der Kontrollproteinzone die neuronale Anhef