Bewertung der Reaktion von Interneuronen auf chemoattraktive Signale von periventrikulären Endothelzellen

Befestigen Sie einen Kultureinsatz mit drei Kompartimenten in einer polymerbeschichteten Schale für die Zellanhaftung.

Drehen Sie die Schale um, markieren Sie das mittlere Fach und richten Sie sie neu aus. Fügen Sie diesem Kompartiment ein Medium mit Interneuronen hinzu.

Geben Sie ein Medium, das humane periventrikuläre Endothelzellen oder PVECs, Gehirngefäßzellen, enthält, in eines der äußeren Kompartimente.

In ein anderes äußeres Kompartiment wird ein Medium mit nicht-periventrikulären Endothelzellen als Kontrolle gegeben.

Geben Sie ein Co-Kulturmedium in die Schale, um ein Austrocknen des Polymers zu verhindern. Inkubieren für Zelladhärenz.

Zerlegen Sie den Einsatz, und erstellen Sie rechteckige Zellflecken mit kleinen zellfreien Lücken zwischen den einzelnen Zelltypen.

Mit dem Co-Kulturmedium auffrischen und inkubieren.

Endothelzellen veranlassen Interneuronen, in zellfreie Räume zu wandern.

In der Zwischenzeit setzen PVECs chemische Lockstoffe frei, die die Migration von Interneuronen in Richtung des PVEC-haltigen Pflasters verstärken.

Eine höhere Interneuron-Migration in Richtung des PVEC-Pflasters als des Kontrollzell-Patches bestätigt die Interneuron-Antwort auf chemoattrak