JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:47 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Multiwell-Platte, die menschliche zerebrale Organoide in einem neuronalen Induktionsmedium enthält.
Die Organoide enthalten Stammzellen, radiale Gliazellen, neurale Vorläuferzellen oder NPCs und Neuronen, die in einem radialen Muster angeordnet sind, das als Rosette bezeichnet wird und das sich entwickelnde Gehirn nachahmt.
Entfernen Sie das Medium und waschen Sie die Organoide mit einem Puffer.
Fügen Sie das in einem Puffer suspendierte Zika-Virus zu den Testvertiefungen hinzu und puffern Sie nur zu den Kontrollvertiefungen.
Inkubieren Sie, so dass das Virus an seine Rezeptoren auf den NPCs binden und internalisiert werden kann.
Waschen, um nicht internalisierte Viren zu entfernen, dann frisches neuronales Induktionsmedium hinzufügen und inkubieren.
Die internalisierten Viren nutzen die Wirtszellmaschinerie, um neue Viruspartikel zu bilden.
Die Virusvermehrung löst eine zelluläre Stressreaktion aus, die Apoptose induziert und die Anzahl der für die Organoidentwicklung verfügbaren NPCs reduziert.
Im Laufe der Zeit weisen die infizierten Organoide eine reduzierte Größe und eine gestörte Morphologie auf, was die abnormale Gehirnentwicklung bei mit dem Zika-Virus infiz
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