Induktion von Neuroinflammation bei Zebrafischlarven mit einer Lipopolysaccharid-Injektion

Nehmen Sie betäubte Zebrafischlarven in eine mit Agarosegel ausgekleidete Schale und stellen Sie sicher, dass das Gehirn für die Injektion nach oben zeigt.

Positionieren Sie die Schale unter einem Mikroskop, um die Hirnventrikel sichtbar zu machen, bei denen es sich um flüssigkeitsgefüllte Hohlräume im sich entwickelnden Gehirn handelt.

Nehmen Sie eine Mikroinjektionsnadel, die eine Lösung von Lipopolysacchariden oder LPS enthält, einer bakteriellen Komponente, um eine Immunantwort auszulösen.

Positionieren Sie die Nadel über dem Tectum des Gehirns, einer Region, in der sich Neuronen und ansässige Immunzellen, insbesondere Mikroglia, befinden.

Punktieren Sie das Gehirn mit der Nadel und injizieren Sie die LPS-Lösung in den Ventrikel.

Mikroglia im umgebenden Gewebe binden über Toll-like-Rezeptoren an LPS.

Die Bindung löst die Freisetzung von proinflammatorischen Zytokinen aus, die Neutrophile an die Stelle rekrutieren, was zu Neuroinflammation führt.

Neutrophile erzeugen Ausbrüche von reaktiven Sauerstoffspezies und setzen proteolytische Enzyme frei, was zum neuronalen Tod führt.

Übertragen Sie die durch Neuroinflammation induzierten Larven in ein Kulturmedium, um sie für nachgelage