JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:52 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit menschlichen embryonalen Stammzellen in einem Kulturmedium.
Inkubieren für die Zellproliferation und Kugelbildung.
Übertragen Sie diese Kugeln in eine neue Vertiefung mit einem Medium, das Differenzierungsfaktoren enthält.
Mit leichtem Schütteln inkubieren. Die Differenzierungsfaktoren treiben die Stammzellen in Richtung der neuronalen Linie.
Tauschen Sie regelmäßig die Hälfte des Mediums aus.
Ersetzen Sie das Medium durch ein neuronales Induktionsmedium und inkubieren Sie dann, um neuronale Vorläuferzellen zu erhalten.
Wechseln Sie zu einem Medium, das an Wachstumsfaktoren reich ist, und inkubieren Sie, um die Zellproliferation und die Bildung neuraler Rosetten zu fördern.
Dann wird in einem Medium kultiviert, das Inhibitoren enthält, um die unerwünschte Zelldifferenzierung zu blockieren.
Ersetzen Sie dieses Medium durch ein Medium, das Wachstumsfaktoren und Inhibitoren enthält. Inkubieren, um die Differenzierung in Gliazellen und primäre Neuronen zu induzieren.
Später platzieren Sie die neuralen Rosetten auf einer hydrophoben Membran in einer inserttragenden Vertiefung, die ein inhibitorreiches Reifungsmedium enthält.
Inkubieren Sie ohne Schütteln, um die Reifung
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