In-vitro-Bewertung von aggregiertem Amyloid-β auf den Kollaps des neuronalen Wachstumskegels
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:18 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem Multi-Well-Kulturobjektträger, der Neuronen eines Mausembryos in einem Medium enthält.
Die Neuronen weisen Wachstumskegel an den Spitzen ihrer wachsenden Axone auf. Zu diesen Strukturen gehören dünne Fortsätze, die als Filopodien bezeichnet werden, und blattartige Fortsätze, die Lamellopodien genannt werden und aus Aktinfilamenten und Mikrotubuli bestehen, Komponenten des Zytoskeletts.
Die Testvertiefungen werden mit aggregiertem Amyloid-β-Protein (Aβ) und die Kontrollvertiefungen mit einer Vehikellösung behandelt.
In den Testvertiefungen bindet aggregiertes Aβ an Membranrezeptoren und initiiert so eine nachgeschaltete Signalübertragung, die das Zytoskelett reguliert und Proteine phosphoryliert.
Die phosphorylierten Proteine stören Aktinfilamente und Mikrotubuli, wodurch die strukturelle Integrität des Wachstumskegels destabilisiert und sein Kollaps verursacht wird.
Inkubieren Sie mit einem Fixiermittel, um die Zellstruktur zu erhalten, waschen Sie dann die Zellen und montieren Sie sie für die Bildgebung.
Vergleichen Sie mit einem Mikroskop die zellulären Strukturen in den Test- und Kontrollvertiefungen.
Ein erhöhtes Auftreten von Wachstumskegelkollaps in Aβ-
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