Detektion von zerebralen Mikroblutungen im Rattenmodell
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:06 Min. • July 8th, 2025
Zerebrale Mikroblutungen (CMHs) sind neuroinflammatorische Hirnblutungen, die durch eine Störung der Blut-Hirn-Schranke verursacht werden und zum Austreten von roten Blutkörperchen (RBCs) in das Hirngewebe führen.
Um CMHs zu erkennen, beginnen Sie mit fixiertem Hirngewebe von einer Ratte mit CMHs.
Tauchen Sie das Gewebe zur Kryoprotektion in Saccharose.
Schneiden Sie das Gewebe mit einem Kryomikrotom und sammeln Sie einen Schnitt auf einem Objektträger.
Waschen, um Reste des Fixiermittels zu entfernen.
Tragen Sie Hämatoxylin-Farbstoff auf, der an ein Metallkation gebunden ist, das mit negativ geladener DNA interagiert und den Zellkern rötlich-violett färbt.
Tragen Sie anschließend Säure-Alkohol auf, um überschüssigen Farbstoff zu entfernen, und tragen Sie dann ein alkalisches Bläuungsmittel auf, um das saure Milieu zu neutralisieren und den Farbstoff in seine blaue Form umzuwandeln, wodurch der Kontrast verbessert wird.
Waschen Sie das Tuch mit Alkohol, um das Eindringen von Flecken zu verbessern, und tragen Sie dann Eosin auf, um die Erythrozyten rot-orange und die Gewebekomponenten rosa zu färben.
Entwässern Sie das Gewebe mit steigenden Alkoholkonzentrationen und reinigen Sie es
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