JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:33 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer bodenlosen Multi-Well-Platte, die an einer Silikonmembran befestigt ist. Die Membran ist mit einem Biopolymer beschichtet, um die Zelladhäsion zu erleichtern.
Führen Sie humane induzierte pluripotente Stammzell-abgeleitete Neuronen (hiPSCNs), die in einem Medium suspendiert sind, in die Vertiefungen ein. Das Medium wird mit extrazellulärer Matrix oder EZM-Proteinen ergänzt, um die Zelladhäsion zu verbessern.
Inkubieren Sie die Platte, so dass die Zellen an den EZM-Proteinen und dem Biopolymer haften können, was eine gleichmäßige Interaktion mit der Membranoberfläche fördert.
Befestigen Sie anschließend die Platte auf der Bühne eines Verletzungsgeräts.
Wenden Sie mit dem Gerät eine Vertiefung auf die Membran an, um eine kontrollierte mechanische Belastung der Neuronen zu erzeugen.
Der Stress stört das Zytoskelett, was zur Degeneration von Zellvorsprüngen, den sogenannten Neuriten, und zur Bildung kleiner Schwellungen entlang der Neuriten führt.
Der Stress schädigt auch die Integrität der Zellmembran, was zum Zelltod führt.
Die hiPSCNs, die einen Phänotyp einer Dehnungsverletzung aufweisen, sind nun bereit für die Analyse.
Um die Platte zu dehnen, ändern Sie di
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