Eine Technik, um Drosophila-Fliegen ein Schädel-Hirn-Trauma zuzufügen

Übernehmen Sie die Kontrolle und testen Sie adulte Drosophila-Fliegen unter Narkose.

Legen Sie die Testfliege in eine Halterung und klopfen Sie vorsichtig darauf, um den Kopf der Fliege außerhalb der Spitze zu positionieren. Stellen Sie sicher, dass die Mundwerkzeuge und der Körper der Fliege im Halter bleiben, um Verletzungen zu vermeiden, die nicht zum Ziel gehören.

Befestigen Sie den Halter mit dem Kopf der Fliege nach unten an einer Schlagvorrichtung.

Das Gerät ist an eine kontrollierte Gasversorgung angeschlossen und enthält einen gasbetriebenen Impaktor, um Verletzungen zuzufügen.

Geben Sie einen Gasstoß ab, um den Impaktor anzutreiben und den Kopf der Fliege zu treffen, wodurch ein Schädel-Hirn-Trauma mit geschlossenem Kopf ohne äußere Schäden ausgelöst wird.

Die daraus resultierende mechanische Belastung schädigt die Neuronen und beeinträchtigt ihre Funktion.

Nehmen Sie den Halter ab, um die Fliege freizugeben, und legen Sie sie dann zur Wiederherstellung in ein Fläschchen.

Wenden Sie für die Kontrollfliege einen Gasstoß an, ohne ihn mit dem Impaktor zu treffen.

Die Kontroll- und Testfliegen sind nun bereit, um die Auswirkungen der Verletzung zu beurteilen.

Betäuben Sie ein einzelnes zwei Tage altes erwachsenes Weibchen mit Kohlendioxid.

Vom Kohlendioxid-Pad aus die Fliege mit einer feinen Bürste vorsichtig in die Halterung befördern.

Klopfen Sie dann vorsichtig auf den Halter, bis der Kopf aus der Spitze herausragt.

Wenn der Rüssel freiliegt, verwenden Sie eine abgestumpfte 1-Milliliter-Spritzennadel, um ihn vorsichtig wieder in die Spitze zu stecken. Es ist wichtig, den Fliegenkörper, insbesondere das Mundteil, in der Halterung zu halten. Andernfalls kann die Fliege an Schäden an den inneren Organen sterben oder daran, dass sie keine Nahrung aufnehmen kann.

Stellen Sie anschließend den Gasdruck auf 100 Kilopascal ein und passen Sie den Durchfluss nach Bedarf an. Sobald die Fliege geladen ist, ziehen Sie den Halter mit dem Konnektor so an den Spritzenzylinder fest, dass der Fliegenkopf nach unten zeigt.

Senden Sie dann mit dem Kippschalter einen Gasstoß, der den Impaktor so bewegt, dass er die Fliege nur einmal trifft.

Löse nun den Fliegenhalter und kippe die Fliege zurück auf das Kohlendioxid-Pad.

Bürsten Sie die Fliege in ein leeres Fläschchen, bis sie sich erholt hat.

Bewahren Sie eine Fliege pro Durchstechflasche auf. Die Wiederherstellung dauert nur wenige Minuten.

Wiederholen Sie den Vorgang, um vier Fliegen pro Versuchsgruppe zu testen. Die Bearbeitung von zwei Gruppen, einem Test und einem Schein, sollte nur 20 bis 30 Minuten dauern. Behandeln Sie Bemänftungen wie Versuchstiere, außer dass Sie keine Aerosolbarriere in das Impaktorröhrchen aufnehmen.