JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:21 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit zwei Spritzen, die mit unterschiedlichen Volumina von Medien gefüllt sind, die die Viren enthalten, die für eine Infektion des Zentralnervensystems (ZNS) bestimmt sind.
Halten Sie den Mauswelpen in Bauchlage. Desinfizieren Sie den Kopf und injizieren Sie das kleinere Volumen der Viruslösung intrazerebral durch die Lambda-Region.
Dadurch können die Viren die Blut-Hirn-Schranke umgehen und direkt in das Hirngewebe gelangen.
Halten Sie als Nächstes den Mauswelpen in Rückenlage. Desinfizieren und injizieren Sie das größere Volumen der Viruslösung in den Bauchraum.
Dies erleichtert die systemische Ausbreitung des Virus durch die Blutgefäße und infiziert andere Teile des ZNS.
Die injizierten Viren dringen in neuronale Zellen ein und nutzen die Wirtsmaschinerie, um sich zu vermehren, was zum Zelltod führt.
Die Viren lösen auch das Immunsystem aus, verursachen ZNS-Entzündungen und etablieren ein ZNS-Infektionsmodell.
Vor Beginn des Infektionsverfahrens verdünnen Sie den nicht angepassten Dengue-Virus 2-Stamm auf 1 mal 10 bis die fünfte plaquebildende Einheit pro 40 Mikroliter RPMI 1640 mittlerer Konzentration. Laden Sie anschließend eine 10,3-Milliliter-Spritze, die mit einer 30-Gauge-Nadel mit 10 Mikrolitern verdünntem Virus ausgestattet ist, und eine 10,3-Milliliter-Spritze, die mit einer 30-Gauge-Nadel ausgestattet ist, mit 30 Mikrolitern Virus pro Tier.
Für die intrazerebrale Verabreichung des Virus drücken Sie das Orakel zwischen Daumen und Zeigefinger, um eine sieben Tage alte säugende Maus des Institute of Cancer Research sanft in Bauchlage zu halten, und injizieren Sie das 10 Mikroliter große Volumen des verdünnten Virus in den Lambda-Bereich am Schnittpunkt der sagittalen und lambdoiden Naht. Nach der intrazerebralen Injektion halten Sie die Maus mit Daumen und Zeigefinger in Rückenlage und injizieren Sie das 30-Mikroliter-Volumen des verdünnten Virus vorsichtig intraperitoneal in den Mausabdomen.