JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:18 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie ein perfundiertes Mäusegehirn in Puffer.
Das Gehirn ist mit Streptomycin-resistenten Listeria monocytogenes, einem pathogenen Bakterium, infiziert.
Der Perfusionsschritt entfernt Blut aus dem Gehirn und stellt sicher, dass die Messungen der bakteriellen Belastung die Belastung mit Listeria monocytogenes im Gewebe widerspiegeln.
Als nächstes homogenisieren Sie das Gehirn mit einem sterilisierten Homogenisator, um das Gewebe abzubauen und Bakterien freizusetzen.
Bereiten Sie nun serielle Verdünnungen des Gehirnhomogenats mit Puffer vor.
Plattieren Sie diese Verdünnungen auf Gehirn-Herz-Infusions-Agarplatten, die Streptomycin, ein Antibiotikum, enthalten.
Inkubieren Sie die Platten. Der Hirn-Herz-Infusions-Agar liefert Nährstoffe für das Wachstum von Listeria monocytogenes, während Streptomycin nach resistenten Bakterien selektiert, so dass sich nur Streptomycin-resistente Listerien-Kolonien bilden können.
Zählen Sie die Anzahl der Kolonien auf der Platte, um die koloniebildenden Einheiten zu bestimmen, ein Maß für die lebensfähige infektiöse Bakterienlast im Gehirn.
Öffnen Sie mit einer Pinzette den Schädel, um das Gehirn freizulegen, und platzieren Sie einen Spatel zwisch
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