Generierung eines Mausmodells für ein Schädel-Hirn-Trauma mit Hilfe eines lateralen Flüssigkeitsperkussionsgeräts

Nehmen Sie eine betäubte Maus und tragen Sie Augensalbe auf, um ein Austrocknen der Augen zu verhindern.

Rasieren Sie den Kopf, desinfizieren Sie die Kopfhaut und schneiden Sie in die Sagittalebene, um den Schädel freizulegen.

Entfernen Sie die Bindegewebsschicht und markieren Sie den Zielbereich für Verletzungen.

Bohren Sie, um einen Knochenlappen zu erstellen, und entfernen Sie ihn dann, um die Dura mater, die äußere Hülle des Gehirns, freizulegen.

Legen Sie eine Kanüle über die Dura mater und befestigen Sie sie mit Zahnzement.

Füllen Sie die Kanüle mit Kochsalzlösung, achten Sie darauf, dass sich keine Luftblasen bilden, und verbinden Sie sie mit dem Schlauch des lateralen Flüssigkeitsperkussionsgeräts, das ein Pendel und ein mit Flüssigkeit gefülltes Reservoir enthält.

Lassen Sie das Pendel aus einem kalibrierten Winkel los, um auf das Reservoir zu treffen, wodurch ein Druckimpuls erzeugt wird, der durch die Flüssigkeit wandert und das Gehirn erreicht.

Die mechanische Belastung schädigt Neuronen und verursacht ein Schädel-Hirn-Trauma.

Entfernen Sie die Kanüle, nähen Sie den Schnitt und lassen Sie die Maus sich für die weitere Analyse erholen.

Bei der Induktion eines Schädel-Hirn-Traumas bestätigen Sie bei einer anästhesierten Maus eine mangelnde Reaktion auf das Einklemmen der Zehen und tragen Sie Salbe auf die Augen des Tieres auf. Desinfizieren Sie nach der Rasur die freiliegende Kopfhaut mit 70% Ethanol, bevor Sie die Kopfhaut in einer sagittalen Ebene einschneiden. Ziehen Sie den Schnitt mit einer Pinzette beidseitig zurück und trennen Sie das Periost leicht.

Zeichnen Sie mit einem Marker einen Kreis mit einem Durchmesser von 3 Millimetern auf den rechten Parietalbereich des Schädels, 2 Millimeter von der Mittellinie entfernt. Verwenden Sie eine elektrische Bohrmaschine, um vorsichtig in den Schädel einzudringen, ohne die Dura zu beschädigen. Entfernen Sie den Knochenlappen, um ein 3 Millimeter dickes Knochenfenster freizulegen, und platzieren Sie eine plastische Verletzungskanüle über der Kraniotomie.

Nachdem Sie die Kanüle mit Zahnacryl am Schädel zementiert haben, verwenden Sie eine 5-Milliliter-Spritze, um die Kanüle mit steriler 0,9%iger normaler Kochsalzlösung zu füllen, wobei darauf zu achten ist, dass keine Blasen entstehen. Schalten Sie das Oszilloskop und den Verstärker ein. Vergewissern Sie sich, dass das Hochdruckrohr der Vorrichtung zum Eintritt der lateralen Flüssigkeit frei von Luftblasen ist, und geben Sie etwa 10 Testimpulse ab, bis das Gerät ein gleichmäßiges Signal gibt.

Passen Sie den Winkel der Pendelausgangsposition so an, dass eine Pulsintensität von etwa zwei Standardatmosphären erreicht wird, und verbinden Sie die Eintrittskanüle mit der Vorrichtung zur Verletzung der lateralen Flüssigkeitsperkussion. Ziehen Sie den Abzug, um das Pendel zu lösen und die Hirnverletzung auszulösen. Erzeugen Sie dann einen Impuls und übertragen Sie ihn durch das gesamte geschlossene, mit Flüssigkeit gefüllte Schlauchsystem an die Dura.

Entfernen Sie nach der Einleitung einer Hirnverletzung die Kanüle und nähen Sie den Schnitt. Legen Sie dann die Maus auf ein Heizkissen mit Überwachung, bis sie gehfähig ist, bevor Sie das Tier in seinen Käfig zurückbringen, in dem es nach Belieben Zugang zu Futter und Wasser hat.