Induktion von Levodopa-induzierten Dyskinesien in einem Rattenmodell der Parkinson-Krankheit

Nehmen Sie eine Spritze, die mit Levodopa, einer Dopaminvorstufe und einem Dopamin-Umwandlungshemmer gefüllt ist.

Injizieren Sie diese Lösung in das Unterhautgewebe einer gefixten Ratte mit Parkinson-Krankheit, die geschädigte Dopamin-produzierende Neuronen aufweist.

Bei der Ratte bindet der Hemmstoff an Dopamin-produzierende Enzyme und verhindert die vorzeitige Umwandlung von Levodopa in Dopamin.

Levodopa gelangt in den Blutkreislauf, überquert die Blut-Hirn-Schranke über Aminosäurekanäle und gelangt in die nicht geschädigten Dopamin-produzierenden Neuronen.

Die Enzyme in diesen Neuronen wandeln Levodopa in Dopamin, einen exzitatorischen Neurotransmitter, um und geben ihn an die Synapse ab.

Dopamin bindet an seine Rezeptoren auf den postsynaptischen Neuronen und löst so die Signalübertragung aus.

Wiederholen Sie die Injektionen regelmäßig, um die Dopaminproduktion zu erhöhen.

Im Laufe der Zeit führt übermäßiges Dopamin zu einer Überstimulation seiner Rezeptoren und einer übermäßigen neuronalen Signalübertragung, die schließlich die Körperbewegungen der Ratte stört.

Setze die Ratte in einen Käfig und beobachte ihr Verhalten. Die Ratte zeigt unwillkürliche, sich wiederholende Körperbewegungen, die als Dyskinesien bekannt sind und durch Levodopa induziert werden.

Vor der L-DOPA-Injektion das entsprechende Volumen steriler Kochsalzlösung zu der vorgewogenen, lyophilisierten Mischung aus L-DOPA und Benserazid in der braunen Durchstechflasche geben und 10 Sekunden lang gut schütteln. Unmittelbar nach der Aufbereitung füllen Sie das erforderliche Volumen des L-DOPA-Benserazid-Mixes für jedes Tier in einzelne Spritzen ab, die mit einer 26-Gauge-Nadel befestigt sind, und beschriften Sie jede Spritze mit einer individuellen Tieridentifikation.

Nachdem Sie den ersten Käfig zur Injektionsbank gebracht haben, nehmen Sie die Ratte aus ihrem Käfig und platzieren Sie sie auf der Injektionsfläche. Verwenden Sie die nicht-dominante Hand, um den Kopf und die Schultern der Ratte mit der Handfläche gegen die Oberfläche zu halten, und kratzen Sie mit Daumen und Zeigefinger die Haut auf dem Rücken über den Schulterblättern ab. Verwenden Sie die dominante Hand, um L-DOPA-Volumen in den subkutanen Raum zwischen den Fingern zu injizieren, wobei Sie die Nadel parallel zum Körper halten, um eine intramuskuläre Injektion zu vermeiden.

Bringen Sie die Ratte nach der Injektion in den Käfig. Stellen Sie dann den Timer auf ein bis zwei Minuten und wiederholen Sie den Vorgang, indem Sie alle ein bis zwei Minuten eine Ratte injizieren, bis alle Ratten injiziert sind. Positionieren Sie am Bewertungstag einen Timer neben dem Käfig, um die durch Levodopa induzierte Dyskinesie oder die Intensität des LID-Verhaltens zu beobachten, während Sie die Häufigkeit eines bestimmten Verhaltens während des Bewertungszeitraums schätzen.

Bewerten Sie die Intensität und Häufigkeit der dystonen und hyperkinetischen Dyskinesiebewegungen, einschließlich des anfänglichen Beginns des LID-Verhaltens, des Spitzenverhaltens und der Phase des Rückgangs zu der gewünschten Anzahl von Zeitpunkten. Wenn Sie Bewertungsintervalle von einer Minute verwenden, stellen Sie einen Timer auf eine Minute ein, um die erste Ratte zu bewerten, und setzen Sie die Bewertung in Abständen von einer Minute für alle Ratten fort.